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Descripción de la tinción de Gram. Método muy utilizado en la biología.
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1. En un máximo de media página realice una descripción general de las bacterias, incluyendo: características estructurales, clasificaciones más utilizadas, importancia de las mismas en diversos campos. Las bacterias son microorganismos procariotas que presentan un tamaño de unos pocos micrómetros (por lo general entre 0,5 y 5μm de longitud) y diversas formas incluyendo filamentos, esferas (cocos), barras (bacilos), sacacorchos (vibrios) y hélices (espirilos). Las bacterias son células procariotas, por lo que no tienen el núcleo definido ni presentan, en general, orgánulos membranosos internos. Generalmente poseen una pared celular y ésta se compone de peptidoglicano. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son móviles. Muchas industrias dependen en parte o enteramente de la acción bacteriana. Gran cantidad de sustancias químicas importantes como alcohol etílico, ácido acético, alcohol butílico y acetona son producidas por bacterias específicas. También se emplean bacterias para el curado de tabaco, el curtido de cueros, caucho, algodón, etc. Las bacterias (a menudo Lactobacillus) junto con levaduras y mohos, se han utilizado durante miles de años para la preparación de alimentos fermentados tales como queso, mantequilla, encurtidos, salsa de soja, chucrut, vinagre, vino y yogur.
2. Indique la importancia de las siguientes bacterias: Neisseria gonorrhoeae: es un diplococo Gram negativo, oxidasa positivo, que causa
la gonococia, una enfermedad de transmisión sexual que se presenta en los humanos.1 Se diferencia de otros tipos de Neisseria por la prueba de la fermentación de carbohidratos, fermentando solamente a la glucosa.
Treponema palllildul: es una especie del género Treponema, compuesto por entre ocho a veinte espiras enrolladas, dándole un movimiento de rotación similar a un sacacorchos. Mide de 5 a 20 micras de largo y 0,5 de diámetro, es una espiroquetaaltamente contagiosa. Es causante de varias enfermedades del ser humano, principalmente la sífilis.
Salmonella typhi: es un bacilo gram negativo que pertenece a la familia Enterobacteriaceae. La causa más común del envenenamiento de comida por especies de Salmonella es la S. typhimurium. Como su nombre sugiere, esta bacteria causa enfermedades parecidas a la fiebre tifoidea en ratones. ocasionada por el bacilo de Eberth.
Escherichia coli: Se trata de una enterobacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo. Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo, además de producir las vitaminas By K. Es un bacilo que reacciona negativamente a la tinción de Gram (gramnegativo), es anaerobio facultativo, móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa y su prueba de IMVIC es ++--.
Clostridium botulinum: es el nombre de una especie de bacilo (Gram positiva anaerobia) que se encuentra por lo general en la tierra y es productora de la toxina botulínica, el agente causal del botulismo. Es usada para la preparación de Botox, usado selectivamente para paralizar los músculos y temporalmente aliviar las arrugas. Tienen otros usos médicos, tales como el tratamiento del dolor facial severo como el causado por neuralgia del trigémino.
Bacillus anthracis: pertenece a la familia Bacillaceae. Son bacilos Gram positivos, con un tamaño de 1-3 x 3-10 micras, aerobios o anaerobios facultativos, inmóviles,
encapsulados y formadores de esporas. Junto con Bacillus cereus y Bacillus thuringiensis, constituye el grupo B. cereus. Debido a su elevado potencial infectivo, sus esporas pueden utilizarse como arma bioló- gica en forma de aerosol, y están incluidos en la lista de agentes potenciales de bioterrorismo (categoría A, agentes de alta prioridad).
Lactobacillus bulgaricus: Se utiliza en la tecnología tradicional de la fermentación de la leche empleando estas bacterias como cultivo iniciador, que puede recuperarse por filtración y usarse infinitamente, siempre y cuando se observen algunas medidas mínimas de higiene. Estos productos han sido importantes en la historia del hombre, las fermentaciones han sido utilizadas por siglos en muchos países y su origen se pierde en los albores del tiempo. Se cree que aparecieron como resultado del crecimiento espontáneo de microorganismos bajo condiciones adecuadas para efectuar la fermentación y así evitar la descomposición.
3. Esquematice los grupos de bacterias según su morfología.
4. Elabore un diagrama de flujo de la técnica de Tinción de Gram, e indique el fundamento de la técnica en cuanto a la composición de la pared celular.
Encienda el mechero y
desinfecte el asa, hasta que tome un color
rojo vivo
Espere a que enfríe, sin apagar el
mechero
Tome del cultivo una muestra con el asa
de la parte que aparenta ser un velo
blanco.
Extienda la muestra sobre una gota de agua
destilada en un portaobjetos
Deje secar al aire libre por unos minutos.
Agregue dos gotas de cristal violeta al 1% y
espere un minuto.
Utilice el dispositivo con la bandeja para colocar el
portaobjetos con la muestra y proceda a lavar con agua
destilada hasta que no libere colorante, elimine el
exceso de agua.
Agregue una gota de solución de Lugol al 1%
y espere hasta que la preparación se ponga
color negro.
Decolore, aplicando gota a gota una
solución de Alcohol-acetona, mantenga inclinada la lámina,
para que escurra hasta que no muestre color
Finalmente agregue una gota de Safranina al 1%
por varios minutos y lave nuevamente con agua destilada, hasta que no
destiña.
Seque con calor moderado.
Observe su preparación, en seco débil, seco fuerte, y por último
con objetivo de Inmersión, utilizando una gota de aceite de
inmersión.
Clasifique la muestra en Gram positivo o negativo
Productos que se utilizan
Reacción y coloración de las bacterias
GRAM + GRAM -
1) Cristal violeta
Células color violeta Células color violeta
2) Lugol solución iodada
Se forma el complejo CV-I. Las células continúan teñidas de color violeta.
Se forma el complejo CV-I. Las células continúan teñidas de color violeta.
3) Alcohol Se deshidratan las paredes celulares. Se contraen los poros. Disminuye la permeabilidad. El complejo CV-I no sale de las células que continúan teñidas de color violeta.
Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. Aumenta la porosidad. El complejo CV-I se separa de la célula.
4) Safranina Células no decoloradas; quedan teñidas de color violeta.
Células decoloradas; se tiñen de color rosado.